Подбор тестов для оценки нейропсихического состояния крыс при ишемии головного мозга

Г.А. Морозова, Н.А. Малиновская, А.Б. Салмина, М.М. Петрова, С.В. Прокопенко, Ю.К. Комлева, Ю.А. Панина
Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, НИИ молекулярной медицины и патобиохимии,
г. Красноярск


 Цель исследования: Выбор оптимального набора тестов для оценки нейропсихических функций крыс в экспериментальных моделях глобальной и фокальной ишемии головного мозга.

Материалы и методы: Объект исследования – крысы-самцы Wistar c массой 180-200 г в количестве 50 (все животные, кроме крыс с 1-сторонней перевязкой) и белые беспородные самцы крыс массой 180-200 г в количестве 20 (животные с 1-сторонней перевязкой).Экспериментальная модель острой фокальной ишемии головного мозга (n=20) осуществлялась анестезированным животным путем экстравазальной окклюзии правой общей сонной артерии (ОСА), а модель острой глобальной ишемии (n=20) - путем экстравазальной билатеральной окклюзии обеих ОСА с последующей оценкой всех тестируемых параметров через 24 и 48 часов после выполнения операций. Контролями явились ложно-оперированные животные (sham-операция, n=20) с последующей оценкой всех тестируемых параметров в те же сроки после выполнения ложной операции и интактные животные (n=10). Анализ неврологического статуса крыс проводился с помощью NSS-теста, когнитивной дисфункции – с использованием водного лабиринта Морриса. Оценка сенсорной дисфункции крыс в моделях ишемии осуществлялась с использованием «вибриссового» теста, моторная дисфункция задних лап оценивалась в тесте «сужающаяся дорожка», передних лап – в «адгезивном» тесте. Статистический анализ проводили с помощью теста Манна-Уитни.

Результаты: Результаты применения тестов для оценки состояния крыс приведены в Таблице. Для оценки нейропсихических функций при фокальной ишемии головного мозга высокая значимость отмечена при использовании NSS-теста для оценки моторной, сенсорной сфер, оценки рефлексов и равновесия. При глобальной ишемии головного мозга NSS-тест не показателен, так как у животных в тяжелом состоянии проведение этого теста невозможно ввиду крайне тяжелого состояния и смертности в 50 % случаев. Применение водного лабиринта Морриса нецелесообразно при фокальной ишемии головного мозга, при которой когнитивная дисфункция не развивается. При глобальной ишемии головного мозга применение водного лабиринта Морриса показало свою значимость.

Нейропсихическое состояние крыс при ишемии головного мозга

Тесты

Группы

Шкала NSS, баллы

Когни-тивная функция, сек

Вибриссовый тест, % правильно выполненных попыток

«Сужающаяся дорожка», общее кол-во соскальзыва-ний

«Адгезивный» тест, правильность выполнения

в баллах

К1 (интактные животные,

n=10)

1,2±0,51

13,4±3,75

-

0,4±0,31

-

К2 («ложная операция»,

24 ч,n=10)

До операции:

1,9±0,74

После:

1,6±0,52

До операции:

12,0±1,94

После:

6,3±1,35&

-

До операции:

0,6±0,34

После:

0,7±0,21

-

К3 («ложная операция»,

48 ч,n=10)

До операции:

1,1±0,63

После:

1,9±0,13

&&&

До операции:

16,0±5,47

После:

14,8±5,41

-

До операции:

0,7±0,34

После:

0,7±0,26

-

Э1 (глобаль-ная ишемия,

24 ч, n=10)

До операции:

0,18±0,12

После:

10,0±3,5

&&&& ####

До операции:

16,7±4,88

После:

40,5±19,5

&&&& * ####

-

До операции:

2,6±0,78 $$ #

После:

падение животных

-

Э2 (глобаль-ная ишемия,

48 ч, n=10)

До операции:

1,0±0,55

После:

13,3±0,6

&&&& ####

До операции:

9,6±2,55

После:

24,7±17,75

&&&& ####

-

До операции:

1,4±0,56 $

После:

падение животных

-

Э3 (фокальная ишемия,

24 ч, n=10)

До операции:

0,3±0,15

После:

3,0±0,71

&& #

До операции:

12,9±2,65

После:

11,2±2,06

До операции:

До операции:

10±0 $$$$

####

После:

9,9±2,34

###

До операции:

Слева

5±0

Справа

4,9±0,1

После операции:

Слева

35,4±11,21

Справа

12±2,66

После операции:

Слева

4,5±0,31

Справа

4,2±0,55

Э4 (фокальная ишемия,

48 ч, n=10)

До операции:

0,1±0,11

После:

2,2±0,43

&& $ #

До операции:

15,0±5,98

После:

13,4±4,63

До операции:

До операции:

3,2±1,06 $$$ ###

После:

7,1±1,27 &

####

До операции:

Слева

5±0

Справа

5±0

После операции:

Слева

13,2±3,63

Справа

18,4±4,11

После операции:

Слева

4,3±0,55

Справа

4,3±0,44

Примечание: # - уровень значимости при сравнении групп Э1 и Э3 с группой К2 и Э2, Э4 с К3; & - уровень значимости для сравнения параметров до и проведения операции; $- уровень значимости при сравнении групп Э1-Э4 с группой К1

Адгезивный и вибриссовый тест по техническим причинам не проводились при глобальной ишемии головного мозга, при фокальной ишемии нами не было обнаружено значимых изменений с использованием этих тестов, хотя отмечалась тенденция к асимметрии этих тестов. Для получения более значимых изменений требуется большая выборка животных.

Применение теста «Сужающая дорожка» рекомендовано при моделировании фокальной ишемии головного мозга, при глобальной ишемии – применение этого метода невозможно в связи с тяжестью состояния животных (падение животных с теста) и сложностью выполнения данного теста для животных с более легкой симптоматикой (кружение «на месте» или практически полное отсутствие двигательной активности).

Выводы: Таким образом, оптимальным набором тестов для оценки нейропсихологического статуса крыс при фокальной ишемии является шкала NSS и «сужающаяся дорожка»; при глобальной ишемии – водный лабиринт Морриса. При ишемии головного мозга не исключено использование адгезивного и вибриссового тестов для оценки состояния крыс.

Исследование выполнено при поддержке гранта индивидуальных проектов молодых ученых КГАУ «ККФПН и НТД» и внутривузовского гранта А красГМУ. 


Назад к списку